产品货号:
ALH241
中文名称:
Pfu扩增预混液
英文名称:
2×Pfu PCR MasterMix
产品规格:
1ml|5ml
发货周期:
1~3天
产品价格:
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本制品包含Pfu DNA聚合酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液,浓度为2×。具有快速简便、灵敏度高、特异性强、稳定性好等优点,可最大限度的减少人为误差。适用与高保真PCR反应、复杂模板如GC含量高(>60%),有二级结构等的扩增和大规模的基因检测。
本制品使用方便快捷,能避免PCR操作过程中的污染,使用时只需取适量2×Pfu PCR MasterMix溶液,加入模板和引物,并加入去离子水补足体积,使MasterMix溶液浓度为1×即可进行反应。
- 基因检测:本制品不同批次之间误差很小,特别适合大规模基因检测,半定量PCR实验和微量DNA的检测。
- 高保真DNA扩增:如表达基因的克隆、基因的定点突变、细胞内基因点突变的分析(SNP)和末端补平。PCR产物为平端,纯化后可加A处理再与TA载体连接或使用平末端克隆载体。
组分 | 1mL | 5mL |
2×Pfu PCR MasterMix | 1mL | 5mL |
说明书 | 1份 | 1份 |
保存:-20℃
- 经检测无外源核酸酶活性。
- PCR方法检测无宿主残余DNA。
- 能有效地扩增人基因中的单拷贝基因。
- 室温存放一周,无明显活性改变。
- 使用前请保证充分溶解并混匀,操作需在冰上进行。
- 以下举例仅供参考。实际反应条件因模板、引物等的结构不同而各异,需根据实际情况,设定最佳反应条件。
- 用2×Pfu PCR MasterMix,以人基因组DNA为模板,扩增1kb的片段,反应体系为25μL(如反应体系不同,可按此比例增加或减少用量)。
成分 用量 模板 10pg~1μg Primer 1 0.1~1μL Primer 2 0.1~1μL 2×Pfu PCR MasterMix 12.5μL ddH2O 至25μL - PCR反应循环的设置:
温度 时间 循环数 94℃ 3min 1 94℃ 30sec 30 55℃ 30sec 72℃ 0.5~1kb/min 72℃ 5min 1 - 以质粒为模板扩增,一般1kb/min就足够了。
- 结果检测:反应结束后取5μL反应产物,琼脂糖凝胶电泳检测。
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